現代二胡（台灣也常叫南胡）用純五度定弦：內弦 D4（簡譜 1）、外弦 A4（簡譜 5）。這個二胡調音器打開時基準音就設在 A4＝442 Hz，這是許多國樂團的標準，所以內弦目標約 295.0 Hz、外弦 442 Hz。
常聽到的「G調定弦」「C調定弦」，空弦其實還是 D–A，只是唱名不同：D調唱 1–5、G調唱 5–2、C調唱 2–6、F調唱 6–3。真正要改變空弦音高的，是下面兩種特殊定弦。
使用方法
- 允許使用麥克風，用長弓拉內弦的空弦。
- 顯示偏低就把弦軸轉緊或用微調器調高；偏高則放鬆。
- 內弦調好再調外弦，兩弦都轉綠就完成。
- 跟鋼琴或卡拉OK伴奏一起拉時，把基準音改回 440 Hz。
特殊定弦：G–D 與 C–G
阿炳（華彥鈞）的〈二泉映月〉等曲用傳統「托音胡琴」的定弦：內弦 G3、外弦 D4，比標準 D–A 低一個純五度；劉文金〈長城隨想〉則用 C4–G4。在選單切換後，調音器就以新的音為目標。拉完記得調回標準 D–A。
小技巧
- 先轉弦軸粗調，最後用微調器細調。
- 輕壓、慢弓拉空弦，讀數最穩定。
- 新弦會延展，頭幾天每次練習前都要重新調。
常見問題
二胡內弦和外弦是什麼音？
標準是內弦 D4、外弦 A4，相差純五度。以 442 Hz 為基準時約 295.0 Hz 與 442 Hz；以 440 Hz 為基準時是 293.7 Hz 與 440 Hz。
二胡要調 440 還是 442？
國樂團、學校國樂社多半用 442；自己練習或跟鋼琴、伴奏音軌合奏用 440。兩者只差約 8 cents，重點是和一起演奏的人一致。
C調、F調定弦要把弦調成別的音嗎？
不用。一般說的 C調、F調、G調定弦，空弦仍是 D–A，只是簡譜唱名改變；只有像〈二泉映月〉的 G–D、〈長城隨想〉的 C–G 才要改變音高。
高胡、中胡可以用嗎？
高胡可以，在選單選高胡 G–D（G4–D5）。中胡定 G3–D4 時選 G–D 定弦；定 A3–E4 時請用半音階調音器對照音名。